血漿樣品

(1)用采血針和EDTA抗凝管抽取全血，輕柔上下顛倒混勻后室溫或者4°C保存，并在1小時內進行下一步處理；

(2)4°C條件下，使用吊桶式轉頭1900g離心10min，小心吸取上清即為血漿，最后500μl左右丟棄。得到的血漿再次離心，條件為4°C，3000g，15min，小心吸出血漿，注意不要碰到底部和側面的沉淀物；

(3)將血漿凍存于-80°C；

提示：送樣量最好4mL以上（分離4mL血漿約需要8-10mL全血）。

血清樣品

（有條件的話盡量采用血漿，避免血小板來源的外泌體影響）

(1)用采血針和普通血清管（不含任何試劑，10mL規格）采血10mL；

(2)室溫靜置30min，然后4°C條件下，靜置3～4小時（此時可見血塊析出）；

(3)用移液器吸取上面的淡黃色血清（應該有4mL左右）轉入15mL離心管中，4°C條件下3000g離心15min，小心取上清轉入新的15mL離心管中，最大程度保證血清質量；

(4)離心后的血清15分鐘內凍存于-80°C冰箱；

提示：送樣量最好4mL以上（分離4mL血清約需要10—15mL全血）。

細胞上清

（需采用去除外泌體的培養基）

(1)細胞在正常含有血清的培養基中培養一定時間，貼壁細胞密度在70%-80%，懸浮細胞密度在60%-70%；

(2)對于貼壁細胞，去除原有培養基，換為新的不含外泌體的培養基或者無血清培養基；對于懸浮細胞，300g，4°C，10min收集細胞；

(3)使用不含外泌體的培養基或者無血清培養基懸浮細胞并繼續培養。細胞繼續培養24-48小時，根據細胞的生長速度確定收取上清時間；

(4)收集細胞上清，300g，4°C，離心10min；小心吸取上清，注意避免吸入細胞或者細胞碎片；

(5)3000g，4°C，再次離心15min，確保將細胞或者細胞碎片去除干凈；

(6)取上清，注意避免吸入細胞或者細胞碎片，合并相同的細胞培養液上清樣品，裝入無菌的玻璃瓶，可在4°C短期保存（1～2天），長期保存可凍存于-80°C。建議細胞上清分離后盡快進行外泌體分離，保存在4°C和-80°C，都會對產量有一定的影響；

（7）寄送時液體不要灌太滿，防止結冰后體積膨脹泄露。

尿液

(1)采集前/中后段晨尿，應該盡量選擇受試者的“新鮮”尿液100mL，并注意避免細菌污染，收集前注意對飲食的控制，于4℃臨時保存（不得超過8h）；

(2)并于3000×g離心15min，去除細胞或細胞碎片；

(3)-80℃冰箱中保存。

腦脊液

(1)收集腦脊液10mL，采集方式為腰椎穿刺，樣本一經分離，請務必立即置于冰上或4℃短暫保存（不得超過4h）,避免受到血液污染,勿使用含肝素抗凝劑的采樣管收集盛放；

(2)并于3000×g離心15min，去除細胞或細胞碎片；

(3)-80℃冰箱中保存。

腹水

(1)臨床收集腹水后若不能第一時間處理，請于4℃臨時保存（不得超過8h）；

(2)將采集到的腹水在4℃下（室溫亦可）離心2000g，20min，去除腹水中的殘渣；

(3)-80℃冰箱中保存。